LES VECTEURS

FondamentalLe choix du vecteur dépend du type d’approche choisie lors de l’étude, un vecteur plasmidique sera préférentiellement utilisé pour le séquençage de petit fragments d’ADN (jusqu’à 2 kilo bases), alors que des vecteurs phagiques, YAC (Yeast Artifical Chromosome) ou BAC (Bacterial Artificial Chromosome) sont utilisés pour réaliser des banques d’ADN génomiques.

Il existe plusieurs types de vecteurs, on peut citer:

  • Les vecteurs de clonage qui sont utilisés pour le stockage et la multiplication de fragments d’ADN (amplifier le nombre de copies).

  • Les vecteurs d’expression Destine a transférer un gène et le faire exprimer dans une cellule hôte qui n'est pas sa cellule d'origine.

Les bactériophages

  • Phage λ.

    • Phage M13.

Les plasmides

  • pBR322.

    • pUC :pUC18, pUC19.

Les phagémides

Vecteur artificiel hybride :phage M13+plasmide, exp: pBluescript II.

Les cosmides

Vecteur artificiel hybride (Phage λ+ plasmide).

Les vecteurs navette

Réplication dans une cellule Bactérienne et l'expression dans une cellule eucaryote.

Les banques YAC (yeast artificial chromosome)

Chromosome artificiel de la levure.

Les BAC (Chromosome Artificiel Bactérien)

Chromosome artificiel bactérien.

Le plasmide Ti d’Agrobacterium tumefaciens

Plasmide Ti: pTi (plasmid tumor inducing) de la bactérie Agrobacterium tumefaciens.

Baculovirus

Infecte les cellule des insectes.

Les vecteurs viraux des mammifères

Vecteurs basés sur des virus:

-SV40: virus simien40.

-Rétrovirus.

Transfert direct des gènes

•Transitoire: y’aura pas de transmission a la descendance car le plasmide ne peut pas se répliqué dans la cellule eucaryote.

•Permanente: liposome, micro injection, électroporation.