LES ENZYMES

Les enzymes qui coupent l'ADN

Les enzymes de restriction:

Les enzymes de restrictions sont des protéines ayant une activité enzymatique caractérisée par une capacité de couper l’[1]ADN double brin, de ce fait elles font partie de la grande famille des endonucléases.

  • Le phénomène de restriction:

    Le phénomène de restriction est une réaction chimique qui aboutit au clivage d’un ADN[1] bicatainaire de manière séquence spécifique.

    Il existe dans la nature un nombre important d’enzymes isolées à partir des bactéries, chaque enzyme reconnait une séquence spécifique de 4 à 8 paires de bases qui forment un palindrome, c’est-à-dire ayant la même séquence sur les deux brins, mais en direction opposée.

    La coupure de l’ADN peut aboutir à la libération de bouts francs ou de bouts cohésives (complémentaire, reformer un double brin). [3][2]

Restriction siteInformations[3]
  • Types de coupure

Les enzymes de restrictionInformations[4]
Type de coupureInformations[5]

les nucléases:

Les nucléases dégradent les molécules d'ADN en rompant les liaisons phosphodiesters liant un nucléotide au suivant, Il existe 2 types de nucléases:

•La Dnase: ADN double brin et simple brin. [2]

•La nucléase SI: ADN simple brin. [3][2]

Les enzymes qui ligaturent

Il permet de relier les 2 fragments d'ADN double brins (enzyme capitale puisqu'elle permet la construction de molécules d'ADN recombinées).

ADN ligase: L'enzyme n'agit que si les 2 ADN sont associés par des extrémités cohésives, cette ligase assure la formation des liaisons phosphodiesters

T4 ADN ligase: Elle est capable d'effectuer des ligations entre 2 ADN à bouts francs. [3][2]

Les enzymes qui déphosphorylent

Les phosphatases alcalines

• Active pH[6] alcalin

• Origine bactérienne ou bovine

• Elimination d’un groupement P en 5’ d’une chaine d’ADN .[7] [4][7]

Les enzymes qui phosphorylent

Les kinases

• Transfert d’un groupement P à partir d’une molécule d’ATP[8] à l’extrémité 5’ de l’ADN déphosphorylé

• Extraites de bactéries .[7] [4][7]

Les enzymes qui recopient un acide nucléique

  • ADN ADN : ADN pol I , Klenow, Séquenase, La Taq pol[9]

    • ARN ADN : La retrotranscriptase RT