Travaux pratiques en Biochimie végétale

Mode opératoire

Extraction des proteines

  • Préparer trois tubes à essai avec 0,5g de farine de blé (F), de semoule de blé(S) ou du flocon d'avoine (A).

  • Ajouter 5mL eau distillée et agiter vigoureusement pendant 10 secondes.

  • Laisser décanter 5min et récupérer le surnageant à l'aide d'une micropipette.

Conseil

A ne pas bouger les tubes pour éviter le trouble

Dosage de protéines

  • Prélever 0,2 mL du surnageant et compléter à 1mL par eau distillée.

  • Préparer en parallèle une gamme étalon à différentes concentrations de BSA ( 0-1 mg/mL).

  • Le dosage est effectué selon le tableau suivant :

Tableau 01: Mode opératoire du dosage.
Figure 01: Dosage de protéines dans les céréales.

ComplémentPréparation de la solution R :

Réactif A : Solubiliser 20g de carbonate de sodium dans 1000mL NaOH 0,1N (3,999g NaOH dans 1000mL eau distillée).

Réactif B : Solubiliser 2g tartrate double Na et K dans 100mL eau distillée

Réactif C : Solubiliser 1g de sulfate de cuivre dans 100mL eau distillée.

Solution R : mélanger 960mL du réactif A, 20mL du réactif B et 20mL du réactif C.

Dosage de proteines
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